目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosisfactor-related apoptosis inducingligand,TRAIL)基因结合端粒酶逆转录酶(humantelomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子对人鼻咽癌细胞株CN E-2的靶向治疗作用.方法刺激人外周血淋巴细胞增殖,提取总RNA.采用RT-PCR扩增含有IL-2信号肽和TRAIL凋亡诱导功能区的融合基因,克隆入pGL3-181 hTERT端粒酶启动子下游,构建真核表达载体pGL3-1 81 hTERT/TRAIL.将该载体经阳离子脂质体(lipofection,Lip)转染入CNE-2和人正常肝细胞株H L-7702中,应用流式细胞仪技术(FC M)、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡.结果转染pGL3-1 81 hTERT/TRAIL的CNE-2组,FCM分析G1期前出现凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳可见"梯状"现象;电镜下见细胞缩小、染色质固缩、核断裂等.结论已构建的真核表达载体pGL3-181hTERT/TRAIL转染后能诱导鼻咽癌细胞CNE-2凋亡;在肿瘤研究中,TRAIL结合hTERT启动子可为肿瘤基因治疗的靶向性提供实验依据.
作者：陈剑秋；朱春生；贡振扬；王延生；林家峰；周京风
来源：中国耳鼻咽喉头颈外科 2006 年 13卷 2期
