目的观察端粒酶逆转录酶(Htert) 启动子调控的肿瘤增殖腺病毒CNHK300对肝癌细胞的杀伤作用.方法采用Western 印迹检测了腺病毒E1A在细胞中的表达;通过病毒增殖实验和细胞生长抑制实验,验证CNHK300选择性复制和杀伤能力,并与ONYX-015(E1B 5 5000蛋白缺失的2型和5型嵌和型腺病毒)和wtAd5(野生型腺病毒)进行比较;用携带绿色荧光蛋白的CNHK300-EGFP感染BJ和Hep3B,直观的观察其增殖过程.结果 CNHK300病毒48 h在Hep3B 和HepGII中的增殖倍数分别为40 625和65 326倍,与wtAd5增殖能力相近,较ONYX-015强几倍至十几倍.在BJ正常成纤维细胞中CNHK300病毒增殖能力减弱,CNHK300病毒48 h增殖倍数为180倍,而wtAd5增殖能力仍可高达4000倍.CNHK300在 MOI 0.5集落形成单位/细胞以下就可以有效地杀伤肝癌细胞, MOI 0.002 集落形成单位/细胞时就可以杀伤半数Hep3B细胞,较ONYX-015具有更强的肿瘤杀伤能力.CNHK300对正常成纤维细胞的杀伤力明显弱于wtAd5, CNHK300在MOI100集落形成单位/细胞时BJ细胞存活率近50
作者:李月敏;宋三泰;江泽飞;张琪;苏长青;徐建明;钱炎珍;钱其军
来源:中华医学杂志 2005 年 85卷 7期