目的 评价人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因转染对人椎间盘髓核细胞“安全性”的影响.方法 将构建好的重组腺相关病毒人端粒酶逆转录酶基因( recombinant adeno-associated virus vector-mediated hTERT gene,rAAV-hTERT)按感染复数(multiplicity of infection,MOI) 105 v.g每细胞转染体外培养二代髓核细胞.设立rAAV-hTERT转染组,AAV空病毒转染组及未转染组;利用RT-PCR及Western-blot检测转染后hTERT基因的表达;对体外培养120 d的细胞进行染色体核型分析;将3组细胞(100 μL,3×107/mL)分别注入裸鼠腋下检测其成瘤性,以人Hela细胞为阳性成瘤实验对照.结果 成功检测出rAAV-hTERT转染髓核细胞后hTERT基因的表达;G-带核型分析未见染色体结构异常克隆;3组细胞均未观察到裸鼠体内肿瘤形成.结论 rAAV-hTERT能成功转染人椎间盘髓核细胞并正确表达,rAAV-hTERT转染髓核细胞在有限的体外培养过程中是安全的,可为进一步的在体研究提供安全性证据.
作者：吴剑宏；阮狄克；王德利；张超；何勍；王超锋；张燕；辛洪奎；顾韬；徐成；刘玥
来源：脊柱外科杂志 2012 年 10卷 3期
