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目的:探讨人永生化角质形成细胞(HaCaT)和人皮肤原代角质形成细胞(HEKa)接受紫外线照射后的衰老机制及其凋亡、坏死和细胞周期的改变. 方法:中波紫外线(UVB)小剂量、多次照射HaCaT细胞和HEKa细胞,以细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)化学染色法观察细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞凋亡、坏死和细胞周期阻滞情况;ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blot检测redox蛋白p66Shc的表达;RT-PCR法检测细胞内人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因在UVB照射前后的表达情况.结果:UVB照射后,SA-β-Gal细胞化学染色结果显示HaCaT细胞和HEKa细胞均呈现强阳性染色.HaCaT细胞的凋亡率从(1.81±0.25)

作者:王懿娜;吴炜;彭国平;方红

来源:浙江大学学报(医学版) 2009 年 38卷 3期

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作者:
王懿娜;吴炜;彭国平;方红
来源:
浙江大学学报(医学版) 2009 年 38卷 3期
标签:
紫外线 角蛋白细胞/辐射效应 表皮 端粒,末端转移酶 细胞衰老 细胞凋亡 基因表达
目的:探讨人永生化角质形成细胞(HaCaT)和人皮肤原代角质形成细胞(HEKa)接受紫外线照射后的衰老机制及其凋亡、坏死和细胞周期的改变. 方法:中波紫外线(UVB)小剂量、多次照射HaCaT细胞和HEKa细胞,以细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)化学染色法观察细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞凋亡、坏死和细胞周期阻滞情况;ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blot检测redox蛋白p66Shc的表达;RT-PCR法检测细胞内人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因在UVB照射前后的表达情况.结果:UVB照射后,SA-β-Gal细胞化学染色结果显示HaCaT细胞和HEKa细胞均呈现强阳性染色.HaCaT细胞的凋亡率从(1.81±0.25)