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目的 探讨CCDC134(coiled-coil domain containing 134)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨分化功能的调控作用.方法 从牙髓组织中,分离培养hDPSCs,并分别以NC-CCDC134、shCCDC134、CCDC134慢病毒转染hDPSCs,分为空白对照组、阴性对照组、CCDC134下调组(shCCDC134)、CCDC134过表达组(CCDC134).流式细胞术检测hDPSCs表面标志物Stro-1、CD105、CD34、CD45;甲苯胺蓝染色检测克隆形成;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP表达;茜素红染色检测矿化结节形成;油红染色检测成脂能力;qPCR检测CCDC134、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、Smad家族成员1(mothers against decapentaplegic homolog 1,SMAD1)的mRNA水平表达;蛋白印迹法检测CCDC134、RUNX2、OCN、BMP-2、SMAD1蛋白表达水平.进一步以BMP-2信号激活剂(BMP-2)和抑制剂(Dorsomorphin)分别干预CCDC134下调及上调的hDPSCs(分组为:shCCDC134、shCCDC134+BMP-2、CCDC134、CCDC134+Dorsomorphin),细胞聚合体移植于裸鼠皮下2个月,HE染色法检测新骨形成.结果 hDPSCs高表达间充质干细胞表面标志物,低表达造血干

作者:徐万田;董文睿;朱文胤

来源:口腔疾病防治 2022 年 30卷 3期

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作者:
徐万田;董文睿;朱文胤
来源:
口腔疾病防治 2022 年 30卷 3期
标签:
牙髓干细胞;CCDC134;成骨分化;组织工程;骨形成蛋白-2;重组人Smad家族成员1;Runt相关转录因子2;骨钙素
目的 探讨CCDC134(coiled-coil domain containing 134)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨分化功能的调控作用.方法 从牙髓组织中,分离培养hDPSCs,并分别以NC-CCDC134、shCCDC134、CCDC134慢病毒转染hDPSCs,分为空白对照组、阴性对照组、CCDC134下调组(shCCDC134)、CCDC134过表达组(CCDC134).流式细胞术检测hDPSCs表面标志物Stro-1、CD105、CD34、CD45;甲苯胺蓝染色检测克隆形成;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP表达;茜素红染色检测矿化结节形成;油红染色检测成脂能力;qPCR检测CCDC134、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、Smad家族成员1(mothers against decapentaplegic homolog 1,SMAD1)的mRNA水平表达;蛋白印迹法检测CCDC134、RUNX2、OCN、BMP-2、SMAD1蛋白表达水平.进一步以BMP-2信号激活剂(BMP-2)和抑制剂(Dorsomorphin)分别干预CCDC134下调及上调的hDPSCs(分组为:shCCDC134、shCCDC134+BMP-2、CCDC134、CCDC134+Dorsomorphin),细胞聚合体移植于裸鼠皮下2个月,HE染色法检测新骨形成.结果 hDPSCs高表达间充质干细胞表面标志物,低表达造血干