目的 探讨热打击联合脂多糖( LPS)刺激对人肠上皮细胞SW480损伤的生物学效应. 方法 体外培养SW480细胞,分为4组,对照组:将细胞置于37℃细胞培养箱中培养2 h;LPS刺激组:使用1 μg/mL LPS刺激细胞6 h;热打击组:将细胞置于43℃细胞孵箱中培养2 h;联合组:先将细胞置于43℃细胞孵箱中培养2 h,然后再用1 μg/mL LPS刺激6 h. 采用乳酸脱氢酶( LDH)法检测细胞毒效应,WST-1检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,通过检测TEER值评估细胞通透性,酶标仪检测Caspase-3酶活性,Westen blot 检测ZO-1蛋白的表达,DCFH-DA观察细胞内活性氧( ROS)水平. 同时采用ROS特异性清除剂MnTBAP预处理细胞,观察MnT-BAP对热打击联合LPS刺激诱导细胞损伤的影响. 结果 与对照组比较,热打击组及LPS刺激组LDH水平均显著升高(P<0.05),细胞存活率均显著降低(P<0.05);与热打击组及LPS刺激组比较,联合组LDH水平均显著升高(P<0.05),细胞存活率均显著降低(P<0.05). 与对照组比较,热打击组及LPS刺激组细胞凋亡率、Caspase-3表达量及ROS水平均显著升高(P<0.05),TEER值及ZO-1表达量均显著降低(P<0.05);与热打击组及LPS刺激组比较,联合组细胞凋亡率、Caspase-3表达量及ROS水平均显著升高(P<0.05),TEER值及ZO-1表达量均显著降低(P<0.05). 进一步研
作者:白永成;潘志国;李勇逵;郑玉美
来源:广东医学 2015 年 36卷 24期