目的 探讨红细胞生成素(EPO)是否可以抑制高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞凋亡及其相关机制.方法 传代培养大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为正常对照组(NC组)、渗透浓度对照组(OC组)、高糖组(HG组)、高糖+EPO 50 U/ml组(E1组)和高糖+EPO 100 U/ml组(E2组).免疫荧光检测NRK-52E细胞有无EPO受体(EPOR)表达.Western印迹检测高糖对EPOR表达的影响.流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡指数.荧光探针CM-H2DCFDA检测细胞内活性氧(ROS)的水平.RT-PCR检测bcl-2、bax、capases-3 mRNA的表达.结果 (1)NRK-52E细胞表达EPOR,且高糖可刺激EPOR表达增加.(2)高糖可诱导NRK-52E细胞凋亡,与葡萄糖相同渗透浓度的甘露醇不能明显诱导细胞凋亡.E1、E2组细胞早、晚期凋亡率显著低于HG组(P<0.05).(3)高糖刺激NRK-52E细胞后,细胞内ROS产生增多,bcl-2 mRNA的表达下调,bax、caspase-3 mRNA的表达上调.EPO可以抑制细胞内ROS的产生,上调bcl-2 mRNA表达,下调bax、caspase-3 mRNA表达.结论 EPO可能通过EPOR的介导,缓解高糖诱导的氧化应激,上调bcl-2 mRNA表达,下调bax、caspase-3 mRNA表达,抑制NRK-52E细胞凋亡.
作者:党建中;贾汝汉;涂亚芳;肖圣顺;丁国华
来源:中华肾脏病杂志 2010 年 26卷 7期