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目的 观察用小干扰RNA(siRNA)敲降B7-H3蛋白的表达对人肺癌细胞A549的细胞周期和凋亡的影响.方法 培养人肺癌A549细胞,将B7-H3蛋白siRNA瞬时转染于A549细胞(称为siB7-H3转染组).实验分为4组,即对照组、siB7-H3转染组、照射组、照射+siB7-H3转染组.采用137Cs γ射线一次性照射,照射剂量为4 Gy;用Western blotting法和实时定量PCR分别检测B7-H3蛋白和mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的改变.结果 与对照组相比,siB7-H3转染组的B7-H3蛋白水平明显降低,mRNA表达量也明显低于对照组且差异有统计学意义(t=-4.222,P=0.013).siB7-H3转染组细胞的G0/G1期细胞阻滞,S和G2/M期细胞数量减少;与对照组相比,照射组出现轻微的G0/G1期阻滞和明显的G2/M期细胞阻滞,照射+siB7-H3转染组的G0/G1、G2/M期均有明显的阻滞.照射后48 h,与对照组相比,照射组细胞的坏死率和凋亡率明显升高,siB7-H3转染组和照射+siB7-H3转染组的坏死率和凋亡率均无明显改变.结论 降低肺癌A549细胞中B7-H3蛋白表达水平可明显增加辐射诱导的G0/G1期阻滞,从而提示B7-H3表达水平的改变可能通过调节G0/G1细胞周期检查点而对肺癌细胞放射敏感性产生重要的调节功能.

作者:董佳丽;罗丹;李源;肖惠文;路璐;崔明;樊赛军

来源:国际放射医学核医学杂志 2017 年 41卷 3期

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作者:
董佳丽;罗丹;李源;肖惠文;路璐;崔明;樊赛军
来源:
国际放射医学核医学杂志 2017 年 41卷 3期
标签:
肺肿瘤 癌,非小细胞肺 细胞周期 细胞凋亡 B7-H3 siRNA Lung neoplasms Carcinoma,non-small-cell lung Cell cycle Apoptosis B7-H3 siRNA
目的 观察用小干扰RNA(siRNA)敲降B7-H3蛋白的表达对人肺癌细胞A549的细胞周期和凋亡的影响.方法 培养人肺癌A549细胞,将B7-H3蛋白siRNA瞬时转染于A549细胞(称为siB7-H3转染组).实验分为4组,即对照组、siB7-H3转染组、照射组、照射+siB7-H3转染组.采用137Cs γ射线一次性照射,照射剂量为4 Gy;用Western blotting法和实时定量PCR分别检测B7-H3蛋白和mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的改变.结果 与对照组相比,siB7-H3转染组的B7-H3蛋白水平明显降低,mRNA表达量也明显低于对照组且差异有统计学意义(t=-4.222,P=0.013).siB7-H3转染组细胞的G0/G1期细胞阻滞,S和G2/M期细胞数量减少;与对照组相比,照射组出现轻微的G0/G1期阻滞和明显的G2/M期细胞阻滞,照射+siB7-H3转染组的G0/G1、G2/M期均有明显的阻滞.照射后48 h,与对照组相比,照射组细胞的坏死率和凋亡率明显升高,siB7-H3转染组和照射+siB7-H3转染组的坏死率和凋亡率均无明显改变.结论 降低肺癌A549细胞中B7-H3蛋白表达水平可明显增加辐射诱导的G0/G1期阻滞,从而提示B7-H3表达水平的改变可能通过调节G0/G1细胞周期检查点而对肺癌细胞放射敏感性产生重要的调节功能.