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目的 探讨B7-H3分子对人非小细胞肺癌细胞系(A549)增殖和侵袭的影响.方法流式细胞术检测A549上B7-H3分子蛋白的表达,慢病毒感染A549以干扰B7-H3表达(B7-H3-A549),并通过Western blot和qPCR对其进行鉴定;CCK8法测定B7-H3-A549和B7-H3+A549两组细胞的增殖差异;Annexin-PE/PI双染和PI单染后,流式检测细胞凋亡和周期的变化;Transwell法评估B7-H3-A549和B7-H3+A549细胞迁移和侵袭的变化;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达.结果A549高表达B7-H3蛋白分子,感染慢病毒后得到B7-H3-A549稳定表达的细胞株及其对照细胞株B7-H3+A549.A549沉默B7-H3后生长速度显著降低.B7-H3-A549组早期凋亡细胞百分率高于B7-H3+A549,两组晚期细胞凋亡率差异无统计学意义;B7-H3-A549细胞在细胞周期G0/G1期受到阻滞.B7-H3-A549细胞的迁移和侵袭能力低于B7-H3+A549细胞.B7-H3-A549细胞中Bad、Caspase-3表达上调,Bcl-2、P-AKT、MMP-9表达下调,总AKT没有明显变化.结论沉默B7-H3分子抑制了A549的增殖和侵袭,促使细胞阻滞于G0/G1期,诱导细胞发生凋亡.

作者:张帅;张东泽;黄子逸;张光波

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2019 年 39卷 5期

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作者:
张帅;张东泽;黄子逸;张光波
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2019 年 39卷 5期
标签:
A549细胞 B7-H3 侵袭 凋亡 A549 cell B7-H3 Invasion Apoptosis
目的 探讨B7-H3分子对人非小细胞肺癌细胞系(A549)增殖和侵袭的影响.方法流式细胞术检测A549上B7-H3分子蛋白的表达,慢病毒感染A549以干扰B7-H3表达(B7-H3-A549),并通过Western blot和qPCR对其进行鉴定;CCK8法测定B7-H3-A549和B7-H3+A549两组细胞的增殖差异;Annexin-PE/PI双染和PI单染后,流式检测细胞凋亡和周期的变化;Transwell法评估B7-H3-A549和B7-H3+A549细胞迁移和侵袭的变化;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达.结果A549高表达B7-H3蛋白分子,感染慢病毒后得到B7-H3-A549稳定表达的细胞株及其对照细胞株B7-H3+A549.A549沉默B7-H3后生长速度显著降低.B7-H3-A549组早期凋亡细胞百分率高于B7-H3+A549,两组晚期细胞凋亡率差异无统计学意义;B7-H3-A549细胞在细胞周期G0/G1期受到阻滞.B7-H3-A549细胞的迁移和侵袭能力低于B7-H3+A549细胞.B7-H3-A549细胞中Bad、Caspase-3表达上调,Bcl-2、P-AKT、MMP-9表达下调,总AKT没有明显变化.结论沉默B7-H3分子抑制了A549的增殖和侵袭,促使细胞阻滞于G0/G1期,诱导细胞发生凋亡.