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目的在细胞水平研究cdk-5过度表达对神经细丝磷酸化的影响.方法用脂质体转染技术将cdk-5基因转入N2a 细胞株中,并建立稳定表达cdk-5的N2a/cdk-5 细胞株,免疫沉淀法及酶活性测定检测cdk-5活性,免疫荧光和免疫印迹技术检测cdk-5的表达和神经细丝的磷酸化状态.结果在N2a 细胞株转染组中,cdk-5表达增加,并使抗体SMI31显色增强,SMI32显色减弱,提示神经细丝被过度磷酸化.与此同时,cdk-5酶活性较未转染组提高3.5倍.结论提示细胞水平的cdk-5过度表达会导致cdk-5过度激活和神经细丝过度磷酸化,而过度磷酸化的神经细丝可能参与了阿尔茨海默病的病理过程.

作者:陈娟;冯友梅;周洁;郑伟;李宏莲;许亮;王建枝

来源:医学分子生物学杂志 2004 年 1卷 2期

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作者:
陈娟;冯友梅;周洁;郑伟;李宏莲;许亮;王建枝
来源:
医学分子生物学杂志 2004 年 1卷 2期
标签:
细胞周期依赖性蛋白激酶5(cdk-5) 神经细丝 阿尔茨海默病
目的在细胞水平研究cdk-5过度表达对神经细丝磷酸化的影响.方法用脂质体转染技术将cdk-5基因转入N2a 细胞株中,并建立稳定表达cdk-5的N2a/cdk-5 细胞株,免疫沉淀法及酶活性测定检测cdk-5活性,免疫荧光和免疫印迹技术检测cdk-5的表达和神经细丝的磷酸化状态.结果在N2a 细胞株转染组中,cdk-5表达增加,并使抗体SMI31显色增强,SMI32显色减弱,提示神经细丝被过度磷酸化.与此同时,cdk-5酶活性较未转染组提高3.5倍.结论提示细胞水平的cdk-5过度表达会导致cdk-5过度激活和神经细丝过度磷酸化,而过度磷酸化的神经细丝可能参与了阿尔茨海默病的病理过程.