目的 探究miR-338-3p靶向T细胞生长因子4 (T cell factor, TCF4) 对肾癌细胞及肿瘤生长的影响.方法 将肾癌细胞786-O分为4组: 对照组、 miR-338-3p mimic组、 pc-TCF4组、 miR-338-3p+TCF4组. qRT-PCR检测miR-338-3p及TCF4 mRNA水平.荧光素酶实验验证miR-338-3p与TCF4靶向关系.免疫印记检测细胞中TCF4、 Ki67、 cleaved caspase-3、血管内皮细胞生长因子 ( VEGF) 及基质金属蛋白酶2 (MMP-2) 的蛋白水平. CCK-8检测细胞增殖.流式细胞术检测细胞凋亡. Transwell检测细胞侵袭.划痕实验检测细胞迁移.免疫组化检测肿瘤组织中Ki67, cleaved caspase-3, VEGF及MMP-2的表达.结果 ①细胞转染miR-338-3p mimic后miR-338-3p表达升高, TCF4 mRNA水平下降, miR-338-3p与TCF4存在靶向关系.②miR-338-3p mimic可降低TCF4蛋白水平, pc-TCF4可提高TCF4蛋白水平, 并减弱miR-338-3p mimic对TCF4的抑制作用.③ miR-338-3p mimic 可降低细胞增殖和 Ki67 蛋白水平, 提高细胞凋亡及 cleaved caspase-3蛋白水平. pc-TCF4可提高细胞增殖和Ki67蛋白水平, 降低细胞凋亡及cleaved caspase-3蛋白水平, 并减弱miR-338-3p mimic的抑增殖促凋亡作用.④ miR-338-3p mimic可降低侵袭细胞数、划痕愈合率及VEGF和MMP-2表达, pc-TCF4可升高侵袭
作者:孙超;王学民;曹赫然;殷凤朝
来源:医学分子生物学杂志 2019 年 16卷 1期