目的 探讨驱动蛋白家族20A(kinesin family 20A,KIF20A)基因对肝癌Huh7 细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制.方法 qPCR检测不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射后Huh7 中KIF20A mRNA表达量,通过慢病毒感染构建沉默KIF20A的Huh7 细胞株,RT-qPCR和蛋白质印迹验证KIF20A沉默效果,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法、集落形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验、划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力,蛋白质印迹检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达.结果 肝癌Huh7 细胞中KIF20A的mRNA表达水平随着X射线剂量的增加而逐渐上调(P<0.05).感染KIF20A siRNA能够显著抑制Huh7 细胞中KIF20A mRNA和蛋白表达(P<0.05).随着辐射剂量的增加,细胞存活率逐渐下降(P<0.05),沉默KIF20A的Huh7 细胞存活率明显降低(P<0.05).沉默KIF20A的Huh7 细胞集落形成率明显降低(P<0.05),侵袭和迁移能力明显受到抑制(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中PI3K水平下调(P<0.05),AKT磷酸化水平减少(P<0.05).结论 沉默KIF20A能够增强肝癌Huh7 细胞放射敏感性,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关.
作者:汪超;杨健睿;李治君;吴林;张军
来源:医学分子生物学杂志 2023 年 20卷 6期