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目的:探讨PM2.5对人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo存活率以及迁移与侵袭能力的影响,寻找PM2.5致不良妊娠结局可能的机制.方法:不同浓度PM2.5染毒HTR8-SVneo细胞建立实验模型,CCK8(Cell Counting Kit-8)法分析细胞增殖情况,最终选取0、30、60、120和200 μg/mL 5个浓度进行后续实验,其中以0μg/mL染毒组为对照组.激光全息细胞分析及成像系统分析细胞迁移力;Transwell侵袭实验分析细胞侵袭力;qPCR和Western Blot分别检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及其组织抑制剂TIMP1、TIMP2的mRNA和蛋白表达水平;明胶酶谱法检测细胞分泌的明胶酶MMP2和MMP9活性.结果:PM2.5对HTR8-SVneo细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05);PM2.5使HTR8-SVneo细胞迁移距离和穿膜细胞数均减少(P<0.05);qPCR和Western Blot结果显示,PM2.5使HTR8-SVneo细胞MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),且MMPs升高程度低于TIMPs;明胶酶谱结果显示,HTR8-SVneo细胞MMP9活性在30、60、120和200 μg/mL染毒组均升高(P<0.05).结论:PM2.5在造成HTR8-SVneo细胞损伤的同时,可能通过打破MMPs/TIMPs的动态平衡影响人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo的迁移与侵袭力,从而造成不良妊娠结局,而具体信号机制有待深入研究.

作者:秦喆;侯海燕;徐忠伟;张立文;韩斌;陈亚琼;吴思雨;姚婷

来源:国际生殖健康/计划生育杂志 2016 年 35卷 5期

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作者:
秦喆;侯海燕;徐忠伟;张立文;韩斌;陈亚琼;吴思雨;姚婷
来源:
国际生殖健康/计划生育杂志 2016 年 35卷 5期
标签:
空气污染物 滋养层 细胞迁移分析 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂 金属蛋白酶2组织抑制剂 Air pollutants Trophoblasts Cell migration assays Matrix metalloproteinase 2 Matrix metalloproteinase 9 Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 Tissue inhibitor of metalloproteinase-2
目的:探讨PM2.5对人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo存活率以及迁移与侵袭能力的影响,寻找PM2.5致不良妊娠结局可能的机制.方法:不同浓度PM2.5染毒HTR8-SVneo细胞建立实验模型,CCK8(Cell Counting Kit-8)法分析细胞增殖情况,最终选取0、30、60、120和200 μg/mL 5个浓度进行后续实验,其中以0μg/mL染毒组为对照组.激光全息细胞分析及成像系统分析细胞迁移力;Transwell侵袭实验分析细胞侵袭力;qPCR和Western Blot分别检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及其组织抑制剂TIMP1、TIMP2的mRNA和蛋白表达水平;明胶酶谱法检测细胞分泌的明胶酶MMP2和MMP9活性.结果:PM2.5对HTR8-SVneo细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05);PM2.5使HTR8-SVneo细胞迁移距离和穿膜细胞数均减少(P<0.05);qPCR和Western Blot结果显示,PM2.5使HTR8-SVneo细胞MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),且MMPs升高程度低于TIMPs;明胶酶谱结果显示,HTR8-SVneo细胞MMP9活性在30、60、120和200 μg/mL染毒组均升高(P<0.05).结论:PM2.5在造成HTR8-SVneo细胞损伤的同时,可能通过打破MMPs/TIMPs的动态平衡影响人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo的迁移与侵袭力,从而造成不良妊娠结局,而具体信号机制有待深入研究.