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目的 探讨环状RNA Circ-CDYL调节多发性骨髓瘤(MM)对硼替佐米(BTZ)的敏感性,以及对miR-223-3p/PHD锌指蛋白19(PHF19)轴的影响.方法 收集盐城市第三人民医院118例MM患者血清标本,其中60例患者未接受任何化疗(BTZ敏感组),58例患者接受BTZ治疗并产生化疗耐药性(BTZ耐药组),比较两组Circ-CDYL及miR-223-3p、PHF19的表达情况.将 MM1.R细胞根据细胞转染情况分为C组、sh-Circ-C 组、sh-Circ-CDYL 组、sh-Circ-CDYL+anti-miR-223-3p 组和 sh-Circ-CDYL+pcDNA-PHF19 组,对 5 组细胞进行相应转染.采用荧光定量PCR(RT-qPCR)测定Circ-CDYL、miR-223-3p和PHF19 mRNA水平,CCK-8法测定MM1.R细胞活性.采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,采用免疫印迹法(Western blotting)检测凋亡蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki6 7、剪切化半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶3(C-caspase 3)]及PHF19蛋白的表达水平,采用 双荧光素酶报告基因实验检测Circ-CDYL与miR-223-3p/PHF19的靶向关系.结果 Circ-CDYL和PHF19在BTZ耐药组患者血清标本和MM1.R细胞中均呈高表达(P<0.05),miR-223-3p呈低表达(P<0.05).下调Circ-CDYL表达下调Circ-CDYL表达可明显降低 MM1.R细胞对BTZ的半数抑制浓度(IC50),抑制增殖活力,使凋亡蛋白PCNA、Ki67表达

作者:周燕;唐云龙;刘佳琦;吴蕾蕾;孙乃同

来源:国际检验医学杂志 2023 年 44卷 10期

知识库介绍

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作者:
周燕;唐云龙;刘佳琦;吴蕾蕾;孙乃同
来源:
国际检验医学杂志 2023 年 44卷 10期
标签:
Circ-CDYL miR-223-3p PHD锌指蛋白19 多发性骨髓瘤 硼替佐米
目的 探讨环状RNA Circ-CDYL调节多发性骨髓瘤(MM)对硼替佐米(BTZ)的敏感性,以及对miR-223-3p/PHD锌指蛋白19(PHF19)轴的影响.方法 收集盐城市第三人民医院118例MM患者血清标本,其中60例患者未接受任何化疗(BTZ敏感组),58例患者接受BTZ治疗并产生化疗耐药性(BTZ耐药组),比较两组Circ-CDYL及miR-223-3p、PHF19的表达情况.将 MM1.R细胞根据细胞转染情况分为C组、sh-Circ-C 组、sh-Circ-CDYL 组、sh-Circ-CDYL+anti-miR-223-3p 组和 sh-Circ-CDYL+pcDNA-PHF19 组,对 5 组细胞进行相应转染.采用荧光定量PCR(RT-qPCR)测定Circ-CDYL、miR-223-3p和PHF19 mRNA水平,CCK-8法测定MM1.R细胞活性.采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,采用免疫印迹法(Western blotting)检测凋亡蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki6 7、剪切化半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶3(C-caspase 3)]及PHF19蛋白的表达水平,采用 双荧光素酶报告基因实验检测Circ-CDYL与miR-223-3p/PHF19的靶向关系.结果 Circ-CDYL和PHF19在BTZ耐药组患者血清标本和MM1.R细胞中均呈高表达(P<0.05),miR-223-3p呈低表达(P<0.05).下调Circ-CDYL表达下调Circ-CDYL表达可明显降低 MM1.R细胞对BTZ的半数抑制浓度(IC50),抑制增殖活力,使凋亡蛋白PCNA、Ki67表达