目的:构建铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-LasR，并在大肠埃希菌中研究其表达效率。方法:提取铜绿假单胞菌PA01株DNA，PCR扩增
lasR基因，并将其与pGEX-1λT连接，构建重组质粒pGEX-LasR。将pGEX-LasR转入大肠埃希菌BL21(DE3)中，筛选阳性克隆，提取质粒进行PCR和双酶切鉴定，然后异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE和Western印迹试验分析和鉴定表达产物。
结果:PCR扩增出717 bp的
lasR基因；双酶切和PCR显示重组质粒构建成功；SDS-PAGE发现重组BL21(DE3)可表达相对分子质量约为53 000的LasR重组蛋白，表达量约占菌体总量的21
作者：欧兴坤；李文桂
来源：国际流行病学传染病学杂志 2021 年 48卷 4期
