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目的:观察脂多糖(LPS)作用下人腹膜间皮细胞(PMCs)表达细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)及其协同激活蛋白p25/p35以及对炎症介质分泌的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞株(HMrSV5),以293T细胞作为阳性对照。在不同浓度LPS作用6 h及LPS(1 μg/mL)作用不同时间点收集细胞。LPS(1 μg/mL)或不同浓度1NMPP1(一种Cdk5信号通路抑制剂)预处理2 h后再加LPS,作用6 h后收集细胞培养上清。用实时定量PCR检测Cdk5 mRNA的表达,用蛋白质印迹和免疫荧光检测Cdk5以及p25/p35的表达,用ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的分泌。结果:Cdk5及其共激活物p25/p35蛋白在HPMCs中均表达。免疫荧光分析显示Cdk5主要分布在HPMCs的胞浆中。LPS(1 μg/mL或2 μg/mL)处理6 h后,HPMCs中Cdk5的表达显著上调。LPS处理后Cdk5的蛋白表达呈浓度和时间依赖性增加,峰值为1 μg/mL和6 h。LPS处理可诱导HPMCs分泌大量细胞因子TNF-α和IL-1β,而随着浓度增加的1NMPP1,可显著降低TNF-α和IL-1β的分泌( P<0.05)。 结论:Cdk5信号通路可能参与LPS诱导的腹腔分泌TNF-α和IL-1β等炎症介质。

作者:李祖楷;冯俊霞;徐嘉琪;李静纯;高学娟;张云芳

来源:国际泌尿系统杂志 2022 年 42卷 5期

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作者:
李祖楷;冯俊霞;徐嘉琪;李静纯;高学娟;张云芳
来源:
国际泌尿系统杂志 2022 年 42卷 5期
标签:
腹膜透析 脂多糖类 细胞周期蛋白依赖激酶5 Peritoneal Dialysis Lipopolysaccharides Cyclin-Dependent Kinase 5
目的:观察脂多糖(LPS)作用下人腹膜间皮细胞(PMCs)表达细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)及其协同激活蛋白p25/p35以及对炎症介质分泌的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞株(HMrSV5),以293T细胞作为阳性对照。在不同浓度LPS作用6 h及LPS(1 μg/mL)作用不同时间点收集细胞。LPS(1 μg/mL)或不同浓度1NMPP1(一种Cdk5信号通路抑制剂)预处理2 h后再加LPS,作用6 h后收集细胞培养上清。用实时定量PCR检测Cdk5 mRNA的表达,用蛋白质印迹和免疫荧光检测Cdk5以及p25/p35的表达,用ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的分泌。结果:Cdk5及其共激活物p25/p35蛋白在HPMCs中均表达。免疫荧光分析显示Cdk5主要分布在HPMCs的胞浆中。LPS(1 μg/mL或2 μg/mL)处理6 h后,HPMCs中Cdk5的表达显著上调。LPS处理后Cdk5的蛋白表达呈浓度和时间依赖性增加,峰值为1 μg/mL和6 h。LPS处理可诱导HPMCs分泌大量细胞因子TNF-α和IL-1β,而随着浓度增加的1NMPP1,可显著降低TNF-α和IL-1β的分泌( P<0.05)。 结论:Cdk5信号通路可能参与LPS诱导的腹腔分泌TNF-α和IL-1β等炎症介质。