目的 观察微小RNA(miR)-758-3p对鼠双微体基因2(MDM2)表达的调控作用及对胃癌细胞MGC803侵袭和增殖的影响.方法 采用生物信息学软件预测MDM2为miR-758-3p靶基因,分别将野生型MDM2基因3'端非翻译区荧光素酶报告基因载体和miR-758-3p靶序列突变型载体及相应的miRNA转染至胃癌细胞MGC803,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性.采用脂质体转染法将miR-758-3p模拟物转入胃癌细胞MGC803,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染效果,Real-time PCR和Western blotting检测转染miR-758-3p后在胃癌细胞中MDM2的表达水平.Transwell实验和CCK-8实验检测细胞侵袭和增殖.采用SPSS 20.0进行统计分析.结果 双荧光素酶报告基因检测系统证实miR-758-3p能够靶向调控MDM2基因(P<0.05).胃癌细胞MGC803转染miR-758-3p模拟物后,miR-758-3p的表达水平(6.68±0.53)明显高于miR-NC组(0.84±0.12),差异有统计学意义(P<0.01).与miR-NC组比较,转染miR-758-3p模拟物后MGC803细胞中MDM2的表达下调(P<0.05).miR-NC组和miR-758-3p组侵袭细胞数量分别为(136.00±16.62)个和(79.49±6.42)个,敲减MDM2之后,细胞的侵袭能力明显下降(P<0.05).CCK-8结果显示,与miR-NC组的增殖比较,转染miR-758-3p组胃癌细胞MGC803的增殖能力明显降低
作者:董明明;李新明;彭书江;刘瑞枝
来源:国际外科学杂志 2018 年 45卷 12期