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目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)-钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对乳鼠肥大心室肌细胞L型钙离子通道电流(ICa-L)和动作电位时程(APD)的调控作用.方法:分离获得1 d龄SD乳鼠心室肌细胞,分为4组,对照组不予干预;苯肾上腺素(PE)组常规培养1 h后加入PE(终浓度0.1 mmol/L)干预24 h;氯沙坦(Los)+PE组先予Los(终浓度1μmol/L)干预1 h,再予PE干预24 h;环孢素A(CsA)+PE组先予CsA(终浓度0.25μg/mL)干预1 h,再予PE干预24 h.实时荧光定量聚合酶链反应检测肌球蛋白重链β(β-MHC)的mRNA表达水平.Western blot检测CaN A亚基β亚单位(CaNAβ)蛋白表达水平.全细胞膜片钳技术检测细胞膜ICa-L和单细胞APD.结果:PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均高于对照组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-18.23±1.44)pA/pF对(-10.78±1.87)pA/pF]、50%APD[(25.7±2.4)ms对(15.3±3.0)ms]和90%APD[(197.6±10.6)ms对(91.8±21.3)ms]均高于对照组(P均<0.05).Los+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-14.02±1.51)pA/pF]、50%APD[(20.4±2.9)ms]和90%APD[(128.7±18.5)ms]均低于PE组(P均<0.05).CsA+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流

作者:杨英;夏桂玲;杨龙;何炯红;霍照美;郭楚娴

来源:国际心血管病杂志 2021 年 48卷 5期

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作者:
杨英;夏桂玲;杨龙;何炯红;霍照美;郭楚娴
来源:
国际心血管病杂志 2021 年 48卷 5期
标签:
心室肌细胞;钙电流;动作电位;全细胞膜片钳技术
目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)-钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对乳鼠肥大心室肌细胞L型钙离子通道电流(ICa-L)和动作电位时程(APD)的调控作用.方法:分离获得1 d龄SD乳鼠心室肌细胞,分为4组,对照组不予干预;苯肾上腺素(PE)组常规培养1 h后加入PE(终浓度0.1 mmol/L)干预24 h;氯沙坦(Los)+PE组先予Los(终浓度1μmol/L)干预1 h,再予PE干预24 h;环孢素A(CsA)+PE组先予CsA(终浓度0.25μg/mL)干预1 h,再予PE干预24 h.实时荧光定量聚合酶链反应检测肌球蛋白重链β(β-MHC)的mRNA表达水平.Western blot检测CaN A亚基β亚单位(CaNAβ)蛋白表达水平.全细胞膜片钳技术检测细胞膜ICa-L和单细胞APD.结果:PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均高于对照组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-18.23±1.44)pA/pF对(-10.78±1.87)pA/pF]、50%APD[(25.7±2.4)ms对(15.3±3.0)ms]和90%APD[(197.6±10.6)ms对(91.8±21.3)ms]均高于对照组(P均<0.05).Los+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-14.02±1.51)pA/pF]、50%APD[(20.4±2.9)ms]和90%APD[(128.7±18.5)ms]均低于PE组(P均<0.05).CsA+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流