目的 探讨微小RNA-1280(miR-1280)对膀胱癌细胞株BIU-87细胞p21基因表达的激活作用及对膀胱癌细胞周期及增殖的影响.方法 实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测膀胱癌细胞株T24、5637、J82、BIU-87和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中miR-1280表达水平.选取表达量最低的膀胱癌细胞,分别转染miR-1280模拟物(实验组)和miR-NC(对照组),qRT-PCR检测两组细胞中miR-1280和p21 mRNA表达水平.染色质免疫共沉淀(ChIP)实验验证miR-1280与p21基因启动子的靶向作用.Western blotting分别检测两组细胞中p21、细胞周期依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白A2(Cyclin A2) mRNA和蛋白的表达.流式细胞术检测细胞周期.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力.结果 qRT-PCR结果提示,膀胱癌细胞株T24、5637、J82、BIU-87和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中miR-1280表达分别为0.503±0.094、0.611±0.054、0.567±0.077、0.257±0.032和1.014±0.090,差异有统计学意义(F=1.880,P＜0.001).与膀胱癌细胞株T24、5637、J82相比,BIU-87细胞株中的miR-1280表达量最低(P =0.026,P=0.003,P=0.008).与对照组相比,实验组BIU-87细胞中miR-1280表达显著升高(1041.000±157.500∶1.023±0.118,t=6.606,P＜0.001),p21 mRNA表达亦显著升高(5.280±0.660∶1.

作者：叶志华；黄耿；付金伦；桂定文

来源：国际肿瘤学杂志 2018 年 45卷 3期