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目的 体外研究重组质粒pshRNA-DNMT3b对膀胱癌T24细胞中DNMT3bmRNA和蛋白的沉默效应以及细胞增殖抑制的影响,初步探讨DNMT3b在膀胱肿瘤发生过程中的作用.方法 实验分为空白对照组、HK组及pshRNA.DNMT3b组(24、48、72 h);常规培养T24细胞,用脂质体lipofectamine2000将重组质粒pshRNA-DNMT3b转染进入T24细胞,后进行RT-PCR、Western Blot、MTT检测,观察pshRNA-DNMT3b对T24细胞中DNMT3bmRNA、蛋白质水平变化以及细胞增殖的影响.结果 重组质粒pshRNA-DNMT3b成功的转染进入T24细胞;RT-PCR电泳结果用Gel-pro analyzer图像分析系统进行灰度分析,空白对照组、HK组、pshRNA-DNMT3b组(24、48、72 h)条带的IOD相对比值(DNMT3/13.actin)分别是(99.56±1.24)

作者:张士龙;曾甫清;董继华;朱朝辉;廖贵益;彭世波

来源:中国医师杂志 2008 年 10卷 9期

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作者:
张士龙;曾甫清;董继华;朱朝辉;廖贵益;彭世波
来源:
中国医师杂志 2008 年 10卷 9期
标签:
DNA(胞嘧啶-5-)-甲基转移酶 RNA干扰 膀胱肿瘤 DNA(cytosine-5-)-methyhransferase RNA interference Bladder neoplasms
目的 体外研究重组质粒pshRNA-DNMT3b对膀胱癌T24细胞中DNMT3bmRNA和蛋白的沉默效应以及细胞增殖抑制的影响,初步探讨DNMT3b在膀胱肿瘤发生过程中的作用.方法 实验分为空白对照组、HK组及pshRNA.DNMT3b组(24、48、72 h);常规培养T24细胞,用脂质体lipofectamine2000将重组质粒pshRNA-DNMT3b转染进入T24细胞,后进行RT-PCR、Western Blot、MTT检测,观察pshRNA-DNMT3b对T24细胞中DNMT3bmRNA、蛋白质水平变化以及细胞增殖的影响.结果 重组质粒pshRNA-DNMT3b成功的转染进入T24细胞;RT-PCR电泳结果用Gel-pro analyzer图像分析系统进行灰度分析,空白对照组、HK组、pshRNA-DNMT3b组(24、48、72 h)条带的IOD相对比值(DNMT3/13.actin)分别是(99.56±1.24)