报道了一种筛选高表达融合蛋白HSA-IL-11的毕赤酵母转化子的免疫双膜筛选法.将生长在醋酸纤维素滤膜上的转化子进行原位诱导,再用硝酸纤维素滤膜对表达的蛋白进行原位捕捉,并经封闭过夜后使用抗HSA抗体进行免疫杂交,再用标记二抗进行显色.根据显色强弱将转化子分为强阳性、中等和阴性三类,再用抗IL-11抗体进行复筛验证.结果显示,抗HSA抗体所筛得的200株强阳性转化子中190株在抗IL-11抗体杂交验证中呈现强阳性反应,而无一株呈现阴性反应.这表明,利用免疫学方法筛选人白介素11-人血清白蛋白融合蛋白高表达菌株时,可以只使用抗HSA抗体进行一步筛选.挑选各种转化子进行摇瓶复筛和SDS-PAGE分析,结果显示,转化子融合蛋白表达量与免疫学显色反应之间呈现高度相关性,这表明利用所建立的免疫学方法筛选融合蛋白高表达转化子是可行的.
作者：吴琼；王亚；苏婷；段作营；金坚；李华钟
来源：工业微生物 2011 年 41卷 5期
