目的: 制备抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,提高scFv637的稳定性.方法: 用PCR扩增人HSA基因,并克隆到含有抗人乙酰胆碱受体scFv637基因的载体pHEN2中构建重组载体pHEN2-scFv637-HSA.以重组载体转化E.coli HB2151,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE和Western blot鉴定其融合蛋白的相对分子质量(Mr).结果: 琼脂糖凝胶电泳显示,扩增的人HSA基因和融合基因的大小分别为1 770 bp和7 054 bp.构建的scFv637-HSA经测序证实核苷酸序列正确,并且正确克隆至载体的开放读码框架内.表达产物仅存在于pHEN2-scFv637-HSA转化的E.coli HB2151外周质裂解液中.表达的融合蛋白的Mr约为95 900.结论: 在E.coli中成功地表达scFv637-HSA融合蛋白,为进一步对其进行功能研究和应用奠定了基础.
作者：范华英；孟繁平；齐栋；魏晶；李强；李英信；李红花
来源：细胞与分子免疫学杂志 2006 年 22卷 4期
