目的: 重组表达抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(scFv)1956#, 提高scFv1956#的可溶性表达量.方法: 用PCR扩增含抗人AChR scFv1956#的载体pHEN1中的scFv1956#结构基因, 并将其插入到原核表达载体pET44a(+).用重新构建的载体转化E.coli BL21(DE3)pLysS, IPTG诱导表达.用SDS-PAGE来比较更换载体及不同温度和时间对可溶性表达量的影响, 并通过Western blot进行鉴定.结果: PCR产物大小为785 bp, 与预计相符; 所构建质粒经测序证实scFv1956# 核苷酸序列正确, 并正确插入载体pET44a(+).诱导后得到的可溶性表达量优于原载体pHEN1.结论: 载体pET44a(+)表达的端融蛋白NusA可以帮助scFv1956# 的正确折叠, 从而获得大量可溶性表达.低温长时间诱导有助于提高可溶性表达的量.
作者：宋琛；徐江；张芳琳；白文涛；李柱一
来源：细胞与分子免疫学杂志 2008 年 24卷 3期
