目的: 真核表达抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,以提高融合蛋白的产量和增强其生物学活性.方法: 将携带有重组质粒的毕赤酵母菌GS115用G-418筛选高拷贝重组转化子克隆,诱导表达目的蛋白,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量(Mr),应用间接免疫荧光技术确定融合蛋白与人肋间肌乙酰胆碱受体(AChR)的亲和性.结果: 斑点杂交试验显示成功表达出目的蛋白,其Mr约为97 400,在人肋间肌细胞膜之间有荧光出现.结论: 在毕赤酵母菌GS115中成功表达出scFv637-HSA融合蛋白,并且融合蛋白可以与人肋间肌AChR结合,这为进一步研究融合蛋白的功能和应用奠定了基础.
作者:李芳芳;孟繁平;孙昌元;温爱萍;魏晶;李红花;李英信
来源:细胞与分子免疫学杂志 2009 年 25卷 8期