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丁香酚因具有抑菌、抗肿瘤、廉价易得等特性,被广泛应用于医药、香料及调味剂等领域.但因其不稳定、易升华、水溶性差等缺点,限制了它的进一步应用.糖基化修饰可显著提高丁香酚的应用特性,本研究利用重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3) pET28a-aglA高效表达的源自野油菜黄单胞菌的葡萄糖基转移酶,生物催化丁香酚生成α·葡萄糖基化丁香酚(α-EG).同时对其生物合成中酶催化反应性质进行了研究.结果表明其最适反应条件:pH =8.5,温度为35℃,丁香酚与麦芽糖最适浓度分别为60 mmol/L及1.2 mol/L.该酶在pH 6~8及4℃~30℃内能保持较好的稳定性.1 mmol/L金属离子Cu2能强烈抑制糖基转移酶活性,而1 mmol/L金属离子Fe2+对酶的催化反应有显著的促进作用.采用最优催化条件,反应100 min,α-葡萄糖基化丁香酚(α-EG)的转化率为75%.

作者:邵梦格;陈路易;朱林江;陈小龙

来源:工业微生物 2018 年 48卷 4期

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作者:
邵梦格;陈路易;朱林江;陈小龙
来源:
工业微生物 2018 年 48卷 4期
标签:
重组大肠杆菌 葡萄糖基转移酶 生物催化 α-葡萄糖基化丁香酚
丁香酚因具有抑菌、抗肿瘤、廉价易得等特性,被广泛应用于医药、香料及调味剂等领域.但因其不稳定、易升华、水溶性差等缺点,限制了它的进一步应用.糖基化修饰可显著提高丁香酚的应用特性,本研究利用重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3) pET28a-aglA高效表达的源自野油菜黄单胞菌的葡萄糖基转移酶,生物催化丁香酚生成α·葡萄糖基化丁香酚(α-EG).同时对其生物合成中酶催化反应性质进行了研究.结果表明其最适反应条件:pH =8.5,温度为35℃,丁香酚与麦芽糖最适浓度分别为60 mmol/L及1.2 mol/L.该酶在pH 6~8及4℃~30℃内能保持较好的稳定性.1 mmol/L金属离子Cu2能强烈抑制糖基转移酶活性,而1 mmol/L金属离子Fe2+对酶的催化反应有显著的促进作用.采用最优催化条件,反应100 min,α-葡萄糖基化丁香酚(α-EG)的转化率为75%.