目的:探讨利用RNAi沉默cdc2基因逆转人卵巢上皮性癌细胞顺铂耐药的可行性,为卵巢癌顺铂耐药逆转提供一个可选择的靶点.方法:针对cdc2基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染卵巢癌顺铂耐药细胞A2780/DDP,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染组cdc2基因表达是否抑制;用MTT法测定转染前后A2780/DDP细胞对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:(1)转染cdc2-SiRNA在RNA及蛋白水平均有效抑制A2780/DDP细胞中cdc2的表达,抑制率分别为78.2％、76.8％;(2)顺铂化疗IC50,A2780/DDP-S(0.66±0.02)较A2780/DDP(5.02±0.05)显著下降(P＜0.01);(3)5 mg/L顺铂作用后,A2780/DDP-S与A2780/DDP比较,各时间点细胞生长抑制率明显增加(P＜0.05),细胞凋亡率明显增多(P＜0.05).结论:在A2780/DDP细胞中,SiRNA能有效抑制cdc2基因的表达,并能部分恢复其对顺铂化疗的敏感性.
作者：任婕；彭芝兰；杨英捷；肖子文
来源：贵阳医学院学报 2015 年 40卷 12期
