目的 研究抑制H9C2心肌细胞Toll样受体4(TLR4)基因表达对缺氧/复氧(A/R)诱导细胞损伤的影响及其机制.方法 H9C2心肌细胞按随机数表法分为正常对照组(Con组):正常培养的H9C2心肌细胞、A/R组:按常规的方法进行缺氧/复氧处理、阴性对照组(NC组)和shRNA+A/R组:分别转染阴性对照TLR4-shRNA质粒和TLR4-shRNA质粒后缺氧/复氧相同的时间.Weston-blot法和RT-PCR法检测RNA干扰(RNAi)的效果;CCK-8法检测心肌细胞的存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Weston-blot法测定B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、核因子-κBp65(NF-κBp65)和NF-κB抑制剂I-κBα)蛋白水平;ELISA法测量培养液中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TN-α)的浓度.观察抑制TLR4表达后是否能通过减轻细胞凋亡和炎症因子的分泌改善A/R诱导的心肌细胞损伤.结果 与Con组比较,A/R组H9C2心肌细胞TLR4与NF-κBp65表达、IL-6和TNF-α水平、细胞凋亡及Bax/Bcl-2比值增加,而细胞存活率和I-κBα表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与A/R组比较,shRNA+A/R组TLR4与NF-κBp65表达、IL-6和TNF-α水平、细胞凋亡及Bax/Bcl-2比值下降,而细胞存活率和I-κBα表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 抑制TLR4能通过抑制炎症反应和细胞凋亡减轻A/R

作者：万为国；叶天新；陈修寰；杨波；张翠

来源：海南医学 2019 年 30卷 24期