目的:研究和探讨溶血磷酸酯(lysophosphatidic acid,LPA)对子宫颈癌干细胞生物学特性的影响及对RhoA/Rock2通路的调控作用,进一步明确宫颈癌的发病机制,并为将来研制宫颈癌靶点药物提供理论依据.方法:以宫颈癌Siha细胞株为原代细胞,球囊培养富集宫颈癌干细胞,观察细胞的克隆形成能力,检测细胞表面标志物.成功培养子宫颈癌干细胞,分为对照组、LP A组及抑制组,对照组正常培养,LPA组分别加入不同浓度(1、5、10、15、20umoL/L)的LPA,抑制剂组以最佳促增殖浓度的LPA细胞组为基础,加入Rho激酶抑制剂Y-27632,观察细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线图,采用PCR法检测各组细胞LPA、RhoA、Rock2的mRNA水平,western blot法检测RhoA及Rock2的表达情况.结果:经培养后有悬浮细胞球形成,细胞表型为CD44+、CK17+、CD34-、CD105-,成功获得子宫颈癌干细胞,加入LPA后,对癌细胞增殖有显著的促进作用,且存在时间与剂量依赖性关系(P<0.05),加入Y-27632后对细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.05),LPA组的LPA、RhoA、Rock2的mRNA水平及RhoA、Rock2蛋白表达量均显著高于对照组与抑制组(P<0.05).结论:LPA可以促进子宫颈癌干细胞的增殖,其作用机制可能是通过调控RhoA/Rock2通路来实现的.
作者：周用；罗保平；许海
来源：河北医学 2021 年 27卷 2期
