目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)RMRP对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响和机制.方法 qRT-PCR检测正常乳腺细胞HBL-100和4种乳腺癌细胞(SK-BR-3、BT-549、MCF-7和MDA-MB-231)中RMRP和miR-613的表达水平.以MCF-7细胞为研究对象,分别构建沉默RMRP或过表达miR-613的乳腺癌细胞株,qRT-PCR检测RMRP和miR-613的表达水平,MTT法检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测增殖相关蛋白(Cyclin D1)和凋亡相关蛋白(Cyt-c、Bax和Bcl-2)的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证RMRP和miR-613的靶向调控关系.结果 与HBL-100细胞相比,4种乳腺癌细胞RMRP的表达显著上调,miR-613的表达显著下调.稳定沉默RMRP或过表达miR-613的细胞株构建成功.沉默RMRP或过表达miR-613均可显著抑制CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达,促进Cyt-c和Bax蛋白的表达,抑制MCF-7细胞增殖,促进细胞凋亡.miR-613是RMRP的靶基因,RMRP可负性调控miR-613的表达.抑制miR-613可逆转沉默RMRP对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响.结论 沉默RMRP通过上调miR-613表达激活线粒体凋亡途径进而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖.
作者:张英;东丽
来源:河北医药 2020 年 42卷 19期