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目的 探讨微小RNA-18b(miR-18b-5p)对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响,并探究其潜在的分子机制.方法 以前列腺癌细胞系DU145为研究对象,采用瞬时转染法将miR-18b-5p inhibitors转染至DU145细胞,其中转染anti-miR-18b-5p的DU/45细胞设为anti-miR-18b-5p组,转染对照的DU/45细胞设为NC组,未行转染的DU/45细胞设为空白对照组(MOCK)组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-18b-5p和HMBOX1 mRNA的表达情况,TargetScan在线数据库预测miR-18b-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹法(Western blot)验证miR-18b-5p和HMBOX1的靶向关系,噻唑蓝比色法(MTT)、克隆形成实验和流式细胞术分析细胞活力、克隆形成和凋亡能力.结果 与Mock组比较,anti-miR-18b-5p组DU145细胞中miR-18b-5p的表达量明显降低(P<0.05),HMBOX1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05),细胞活力和克隆形成能力均明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实了HMBOX1是miR-18b-5p的靶基因.与anti-miR-18b-5p组比较,miR-18b-5p+si-HMBOX1组DU145细胞中HMBOX1的表达明显升高(P<0.05),细胞活力升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05).结论 miR-18b-5p通过靶向HMBOX1调控前列腺癌细胞增殖和凋亡.

作者:叶旭明;牛洪流;赵建军

来源:河北医药 2021 年 43卷 22期

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作者:
叶旭明;牛洪流;赵建军
来源:
河北医药 2021 年 43卷 22期
标签:
miR-18b-5p;HMBOX1;前列腺癌细胞;增殖;凋亡
目的 探讨微小RNA-18b(miR-18b-5p)对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响,并探究其潜在的分子机制.方法 以前列腺癌细胞系DU145为研究对象,采用瞬时转染法将miR-18b-5p inhibitors转染至DU145细胞,其中转染anti-miR-18b-5p的DU/45细胞设为anti-miR-18b-5p组,转染对照的DU/45细胞设为NC组,未行转染的DU/45细胞设为空白对照组(MOCK)组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-18b-5p和HMBOX1 mRNA的表达情况,TargetScan在线数据库预测miR-18b-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹法(Western blot)验证miR-18b-5p和HMBOX1的靶向关系,噻唑蓝比色法(MTT)、克隆形成实验和流式细胞术分析细胞活力、克隆形成和凋亡能力.结果 与Mock组比较,anti-miR-18b-5p组DU145细胞中miR-18b-5p的表达量明显降低(P<0.05),HMBOX1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05),细胞活力和克隆形成能力均明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实了HMBOX1是miR-18b-5p的靶基因.与anti-miR-18b-5p组比较,miR-18b-5p+si-HMBOX1组DU145细胞中HMBOX1的表达明显升高(P<0.05),细胞活力升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05).结论 miR-18b-5p通过靶向HMBOX1调控前列腺癌细胞增殖和凋亡.