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目的 探讨8型腺相关病毒的制备方法 ,初步检测其在体内的表达.方法 采用载体质粒、辅助质粒和包装质粒三质粒磷酸钙共沉淀方法 转染HEK293细胞,包装病毒,经超声破碎-饱和硫酸铵沉淀-氯化铯梯度离心提取并纯化病毒.肌肉注射感染肌肉组织,检测报告基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresent protein, EGFP)在体内的表达活性.结果 成功包装制备出8型腺相关病毒,重组病毒能够有效感染肌肉组织,绿色荧光蛋白在肌肉组织中稳定高效表达.结论 此实验方法 制备病毒的质量能够满足小动物体内实验的要求,为进一步应用其进行基因治疗打下基础.

作者:周保国;乔海泉;佟立权;潘尚哈;孙学英

来源:哈尔滨医科大学学报 2008 年 42卷 6期

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作者:
周保国;乔海泉;佟立权;潘尚哈;孙学英
来源:
哈尔滨医科大学学报 2008 年 42卷 6期
标签:
腺相关病毒 制备 表达 体内 增强型绿色荧光蛋白
目的 探讨8型腺相关病毒的制备方法 ,初步检测其在体内的表达.方法 采用载体质粒、辅助质粒和包装质粒三质粒磷酸钙共沉淀方法 转染HEK293细胞,包装病毒,经超声破碎-饱和硫酸铵沉淀-氯化铯梯度离心提取并纯化病毒.肌肉注射感染肌肉组织,检测报告基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresent protein, EGFP)在体内的表达活性.结果 成功包装制备出8型腺相关病毒,重组病毒能够有效感染肌肉组织,绿色荧光蛋白在肌肉组织中稳定高效表达.结论 此实验方法 制备病毒的质量能够满足小动物体内实验的要求,为进一步应用其进行基因治疗打下基础.