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目的:观察高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对急性髓系白血病细胞株(human leukemiacell line,K562)自噬及化学治疗(化疗)耐药的影响,并探讨其相关的分子机制.方法:体外培养K562细胞,分为化疗药物处理组、化疗药物处理对照组、HMGB1纯化蛋白预处理组、HMGB1纯化蛋白预处理对照组、HMGB1siRNA转染组和HMGB1 siRNA转染对照组,其中化疗药物处理组又分为长春新碱(vincristine,VCR)、足叶乙甙(etoposide,VP-16)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C)、阿霉素(adriamycin,ADM)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)处理组.细胞计数试剂盒-8检测细胞活性;Western印迹检测HMGB1,微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associate proteinllight chain3,LC3),腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m-TOR)磷酸化蛋白表达水平;ELISA法检测细胞上清液HMGB1蛋白含量;单丹磺酰尸胺染色和透射电镜观察细胞自噬状态.结果:与相应对照组比较,各化疗药物处理组(VCR,VP-16,Ara-C,ADM和As2O3)的细胞活性均显著降低,HMGB1蛋白表达均显著上调(均P<0.05).与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白预处理组的细胞活性显著增加(P<0.05),HMGB1蛋白表达

作者:刘丽英;高飞;叶艳琼;陈志衡;戴云鹏;赵平;管国涛;赵明一

来源:中南大学学报(医学版) 2016 年 41卷 10期

知识库介绍

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作者:
刘丽英;高飞;叶艳琼;陈志衡;戴云鹏;赵平;管国涛;赵明一
来源:
中南大学学报(医学版) 2016 年 41卷 10期
标签:
儿童白血病 高迁移率族蛋白1 自噬 化学治疗耐药 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 children leukemia high-mobility group box 1 autophagy chemotherapy resistance AMP-activated protein kinase mammalian target protein of rapamycin
目的:观察高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对急性髓系白血病细胞株(human leukemiacell line,K562)自噬及化学治疗(化疗)耐药的影响,并探讨其相关的分子机制.方法:体外培养K562细胞,分为化疗药物处理组、化疗药物处理对照组、HMGB1纯化蛋白预处理组、HMGB1纯化蛋白预处理对照组、HMGB1siRNA转染组和HMGB1 siRNA转染对照组,其中化疗药物处理组又分为长春新碱(vincristine,VCR)、足叶乙甙(etoposide,VP-16)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C)、阿霉素(adriamycin,ADM)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)处理组.细胞计数试剂盒-8检测细胞活性;Western印迹检测HMGB1,微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associate proteinllight chain3,LC3),腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m-TOR)磷酸化蛋白表达水平;ELISA法检测细胞上清液HMGB1蛋白含量;单丹磺酰尸胺染色和透射电镜观察细胞自噬状态.结果:与相应对照组比较,各化疗药物处理组(VCR,VP-16,Ara-C,ADM和As2O3)的细胞活性均显著降低,HMGB1蛋白表达均显著上调(均P<0.05).与相应对照组比较,HMGB1纯化蛋白预处理组的细胞活性显著增加(P<0.05),HMGB1蛋白表达