目的 探讨西罗莫司对急性髓系白血病U937细胞的自噬以及凋亡的影响.方法 常规方法复苏、传代培养U937细胞,然后分为4组:正常对照组和西罗莫司12 h处理组、24h处理组和48 h处理组,分别以2 μmol/L西罗莫司处理12 h、24 h和48 h后收集细胞,观察西罗莫司不同时间点处理后U937细胞形态和生长状态的变化.采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测细胞的生存率;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;采用实时定量PCR(RT-PCR)方法检测西罗莫司处理U937细胞不同时间点后,自噬标志性蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)基因mRNA表达水平的变化;Western blot方法检测西罗莫司处理U937细胞不同时间点LC3-Ⅱ蛋白表达水平的变化.结果 倒置显微镜下可见西罗莫司处理12 h、24 h和48 h后U937细胞数量逐渐减少,体积变小,细胞碎裂,细胞核固缩及细胞碎片增多;随着时间的延长,U937细胞生存率逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.031);西罗莫司处理U937细胞12h、24 h和48 h后,U937细胞凋亡率逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P =0.027);西罗莫司处理U937细胞12 h、24 h和48 h后,LC3-ⅡmRNA表达和蛋白的表达量均下调,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.029).结论 西罗莫司可诱导U937细胞发生自噬和凋亡.自
作者：许文锋；冯晓勤；李春富；吴学东；何岳林；张玉明；裴夫瑜
来源：中华实用儿科临床杂志 2015 年 30卷 17期
