目的 比较两种中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂GW311616A和西维来司钠(sivelestat)对U937细胞增殖和调亡的影响.方法 采用四唑蓝比色试验(MTT)检测细胞增殖抑制率;用透射电镜观察细胞形态学变化;用流式细胞术检测细胞凋亡[膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双标记法]及细胞周期变化;应用间接免疫荧光法观察细胞内NE表达水平;同时利用ELISA法和比色法检测细胞内NE含量和活性的变化.使用SPSS13.0软件对所得数据进行统计分析,采用完全随机设计资料的方差分析和Dunnett-t检验对各处理组数据进行比较.结果 MTT法检测结果显示两种药物均能抑制U937细胞的增殖,且具有一定的剂量依赖效应,GW311616A和西维来司钠的IC50值分别为150、214 μmol/L.GW311616A对U937细胞的增殖抑制作用高于西维来司钠(P<0.01);电镜结果显示两种药物处理的U937细胞均能看到典型的细胞凋亡形态;Annexin V/PI双标记法结果表明两种药物均能引起U937细胞的早期凋亡,GW311616A(150 μmol/L)组的凋亡率为13.60%,西维来司钠组(150 μmol/L)为3.69%,GW311616A对其凋亡的影响比西维来司钠更明显(P<0.01);流式细胞术检测结果显示GW311616A(150 μmol/L)组的凋亡率为14.61%,细胞周期主要阻滞于G2/M期,西维来司钠(150 μmol/L)组的凋亡
作者:马鹏鹏;朱丹;刘北忠;钟梁;朱新瑜;王慧;张曦;高远梅;胡秀秀
来源:中华血液学杂志 2013 年 34卷 6期