目的:构建原核表达载体pET15b-PEP-1-SOD1,观察PEP-1-SOD1融合蛋白在大鼠离体缺血再灌注损伤心肌组织内的转导能力和转导的目的蛋白是否具有酶活性.方法:构建原核表达载体pET15 b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化大肠杆菌,表达和纯化SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白.采用Langendorff灌流系统,大鼠离体心脏停灌30 min后复灌60 min建立缺血再灌注损伤模型.实验分为对照组,SOD1组,25,50,100 μmol/L PEP-1-SOD1组.免疫荧光检测PEP-1-SOD1的转导效果, SOD试剂盒检测酶活性.结果:在荧光显微镜下,PEP-1-SOD1融合蛋白预处理组心肌组织中可见特异性的绿色荧光位于心肌细胞胞质内,25 ,50,100 μmol/L组阳性率分别为32.6
作者：柯尊平；王家宁；郭凌郧；唐俊明；黄永章；王磊；杨建业
来源：武汉大学学报（医学版） 2007 年 28卷 4期
