原核表达质粒pET15b-PEP-1-SOD1的构建-临床诊疗知识库

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作者：

丁鹏；王家宁；黄永章；杨波

来源：

新乡医学院学报 2006 年 23卷 2期

标签：

铜锌-超氧化物歧化酶 TA克隆基因重组蛋白转导域 PEP-1肽

目的构建pET15b-PEP-1-SOD1原核表达质粒.方法通过设计含有特定酶切位点的引物,以含有全长人SOD1 cDNA的质粒(pBluescript Ⅱ SK-SOD1)为模板,扩增出SOD1 cDNA,将SOD1 cDNA和人工合成的编码PEP-1的双链寡核苷酸克隆至pET15b原核表达载体上,进行酶切鉴定及测序分析.结果pET15b-PEP-1-SOD1重组质粒经酶切鉴定含有SOD1 cDNA和编码PEP-1的片段,测序分析证实分别与GeneBank"AB087266"登录的人SOD1 cDNA和合成的PEP-1编码序列完全一致.结论成功地构建了pET15b-PEP-1-SOD1重组质粒,为制备PEP-1-SOD1融合蛋白提供了表达载体.

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