目的:建立一种高灵敏度、高特异性的蓝舌病毒RNA荧光定量RT-PCR检测技术,能够检测不同血清型蓝舌病毒(BTV).方法:应用改良的BTV双链RNA变性方法,针对BTV基因组片段1和5的相对保守序列设计2对特异性引物,建立了BTV荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法进行灵敏度、特异性、重复性评价.结果:该方法能检测11种不同血清型BTV,其灵敏度可达到10 copies/μl;使用所设计引物的荧光定量PCR能特异地扩增BTV,其Ct值差异较小,并与阴性对照EHDV-5无交叉反应;重复检测CV值小于5%.结论:检测方法具有灵敏度高、特异性强等优点,适用于BTV的快速检测和诊断.
作者:代明;刘军;董长垣;桑明;霍文哲
来源:武汉大学学报(医学版) 2014 年 35卷 6期