目的:研究钙调神经磷酸酶(CaN)与活化T细胞核因子(NFAT)相互作用保守位点衍生的多肽和人免疫缺陷病毒(HIV) TAT的融合多肽对CaN-NFAT信号途径的影响.方法:根据CaN-NFAT的结合位点经计算机优化后得到PVIGIT,并和TAT融合成新的多肽PepNFAT-TAT,用异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记后加至携带CaN催化亚基cDNA的重组质粒pRED-CnA转染过的神经细胞LN-229中,再用离子霉素刺激,用激光共聚焦显微镜观察该融合多肽的细胞定位,并检测该多肽对CaN酶活性的影响,报告基因pNFAT-luc实验检测其对NTAF激活的影响,实时定量RT-PCR检测其对NFAT下游基因白细胞介素-4(IL-4)表达的影响.结果:该融合蛋白定位于细胞质中,报告基因实验显示该多肽能够抑制对NFAT的激活,抑制离子霉素诱导IL-4的表达.结论:融合多肽PepNFAT-TAT能抑制CaN-NFAT信号途径,但对CaN的酶活性没有影响,是潜在的免疫抑制剂.
作者：谢圣高；胡玉倩；黄婧；宁勇；涂建成；郑义
来源：武汉大学学报（医学版） 2015 年 36卷 4期
