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目的:研究Hh信号通路抑制剂Cyclopamine作用Hela细胞后Gli1、FoxM1、上皮间质转化(EMT)过程相关标记物表达的改变及对其增殖、侵袭迁移能力的影响,探究Gii1、FoxM1、EMT过程的可能作用关系,以期为宫颈癌的分子靶向治疗提供多个靶点.方法:采用实时定量RT-PCR、Western Blot技术检测Hela、Siha细胞系Hh信号通路中Shh、Ptch1、Smo的表达情况,选择Hh信号通路表达较高的Heta细胞系作为后续实验细胞,利用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度Cyclopamine作用Hela细胞后其增殖能力的改变;采用Transwell小室试验检测Hela细胞侵袭、迁移能力的改变,并采用实时定量RT-PCR、Western Blot技术检测Gli1、FoxM1、EMT过程标记物的表达情况.结果:①Hela细胞中Hh信号通路成分(Shh、Ptch1、Smo)在mRNA水平显著高于Siha细胞(P<0.01),且相应蛋白的表达强度也高于Siha细胞;②Cyclopamine对Hela细胞增殖的抑制作用具有时间、剂量依赖性;③Cyclopamine作用Hela细胞48 h后,细胞侵袭试验显示,实验组侵袭细胞数较对照组明显降低(P<0.01).细胞迁移试验显示,实验组细胞迁移细胞数较对照组明显降低(P<0.0l);④Cyclopamine作用Hela细胞48 h后,实验组Gli1、FoxM1、Vimentin在mRNA水平的表达显著低于对照组(P<0.05),且相应蛋白的

作者:李盼盼;陈红;李玲玲;陈慧君;王晶晶;杨红;陈丹

来源:武汉大学学报(医学版) 2017 年 38卷 3期

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作者:
李盼盼;陈红;李玲玲;陈慧君;王晶晶;杨红;陈丹
来源:
武汉大学学报(医学版) 2017 年 38卷 3期
标签:
Hh信号通路 Hela细胞 增殖 侵袭迁移 Gli1 FoxM1 EMT Hh Signaling Pathway Hela Cells Proliferation Invasion and Migration Gli1 FoxM1 Epithelial Mesenchymal Transition
目的:研究Hh信号通路抑制剂Cyclopamine作用Hela细胞后Gli1、FoxM1、上皮间质转化(EMT)过程相关标记物表达的改变及对其增殖、侵袭迁移能力的影响,探究Gii1、FoxM1、EMT过程的可能作用关系,以期为宫颈癌的分子靶向治疗提供多个靶点.方法:采用实时定量RT-PCR、Western Blot技术检测Hela、Siha细胞系Hh信号通路中Shh、Ptch1、Smo的表达情况,选择Hh信号通路表达较高的Heta细胞系作为后续实验细胞,利用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度Cyclopamine作用Hela细胞后其增殖能力的改变;采用Transwell小室试验检测Hela细胞侵袭、迁移能力的改变,并采用实时定量RT-PCR、Western Blot技术检测Gli1、FoxM1、EMT过程标记物的表达情况.结果:①Hela细胞中Hh信号通路成分(Shh、Ptch1、Smo)在mRNA水平显著高于Siha细胞(P<0.01),且相应蛋白的表达强度也高于Siha细胞;②Cyclopamine对Hela细胞增殖的抑制作用具有时间、剂量依赖性;③Cyclopamine作用Hela细胞48 h后,细胞侵袭试验显示,实验组侵袭细胞数较对照组明显降低(P<0.01).细胞迁移试验显示,实验组细胞迁移细胞数较对照组明显降低(P<0.0l);④Cyclopamine作用Hela细胞48 h后,实验组Gli1、FoxM1、Vimentin在mRNA水平的表达显著低于对照组(P<0.05),且相应蛋白的