目的:利用口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因(sopox)的克隆序列,重组构建新的不能产生H2O2的口腔链球菌变异株.方法:口腔链球菌株ATCC10557经培养后用酚-氯仿法抽提细菌染色体基因组DNA,经PCR扩增sopox基因,用BamHI进行限制酶切;参照Chris方法进行电转化,挑选阳性菌落测定其上清液中H2O2的含量;将细菌传3～4代后再次重复上述检测.结果:转化子经筛选后得到1株阳性菌落,测定上清液中H2O2含量,第1次检测表明变异株产生H2O2的量仅有所下降(介于阳性对照ATCC 10557和阴性对照大肠杆菌JM109之间),经3～4次传代后变异株中上清液H2O2量已经明显低于阴性对照.结论:成功构建了口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株.
作者：庞若愚；张蓉；章锦才；张蕴惠；俞少杰
来源：华西口腔医学杂志 2002 年 20卷 1期
