目的 研究高糖环境下成纤维细胞生长因子21 (FGF-21)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)骨向分化的作用及其机制.方法 取健康成人骨髓,分离培养hBMSCs,成骨、成脂诱导分化后,茜素红、油红O染色鉴定,流式细胞仪检测第3代细胞表面标志物CD105、CD90、CD73和CD44水平.将hBMSCs分为对照组[以葡萄糖(Glu)浓度5.5 mmol/L模拟正常生理状态糖浓度],Glu A、B、C高糖浓度梯度组(Glu 16.5、25、40 mmol/ L),FGF-21干预组(Glu 5.5 mmol/ L+ FGF-21),高糖环境FGF-21干预组(Glu B+ FGF-21)和Glu B+ FGF-21干预+细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导阻断剂(包括PD98059、SP600125、SB203580)组.成骨诱导第14天,检测碱性磷酸酶(ALP)活性;成骨诱导第21天,以RT-PCR检测骨向分化的相关因子ALP、骨钙素(OCN)、Runx2的mRNA水平,以Western blot检测MAPK通路中细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白磷酸化水平.结果 ①分离培养得到的hBMSCs成骨、成脂诱导后茜红素、油红O染色阳性,hBMSCs被成功地诱导向成骨细胞(OB)和脂肪细胞分化.流式细胞仪鉴定为hBMSCs.②与对照组相比,高糖组的骨向分化标志物ALP、OCN、Runx2的mRNA水平明显增加,MAPK通路中ERK、P38、JNK磷酸化水平表达增加.③与Gl
作者:李茜;陈程;安振梅;李雨珏;张玫;何訸;李双庆
来源:四川大学学报(医学版) 2016 年 47卷 5期