目的 对大鼠Pig-a基因突变试验方法进行优化,并初步探讨阳性诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲(ENU)在该实验中的时-效关系和量-效关系.方法 30只雄性SD大鼠随机平均分为5组,即溶剂对照组,ENU10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg 4个剂量组,连续3d经口灌胃染毒.分别于实验第0、15、30、45、60、75、90天尾静脉取血,分离红细胞,经Anti-CD59-APC和SYTO 13核酸染料标记后采用流式细胞仪分析CD59表型突变为成熟红细胞(RBCCD59-)率、CD59表型突变为网织红细胞(RETCD59-)率以及RET占总红细胞百分率.结果 ENU各组大鼠在染毒后第15~90天的RBCCD59-率呈现随时间和剂量反应性地增高.RETCD59-率随时间延长,ENU各组表现为先增后基本稳定伴小幅波动趋势,但均保持在较高水平,在染毒后30 d出现最高峰,在45 d时出现下降;同时,随着ENU剂量的增加,ENU各组RETCD59-率也随之增加.随时间延长,ENU各组大鼠RET百分率有所下降,30 d后呈现较为稳定的轻微波动,5组间RET%在各时间点处差异均无统计学意义.结论 本研究改良的大鼠Pig-a基因突变试验可进行快速检测,ENU短期(3 d)染毒诱导大鼠红细胞Pig-a基因突变具有时-效关系和量-效关系.
作者:马思佳;霍娇;陈锦瑶;陈奇言;张立实
来源:四川大学学报(医学版) 2017 年 48卷 1期