目的 探讨同源异形盒A 1(HOXA1)基因反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及机制.方法 采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测正常食管上皮细胞Het-1A和人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白的表达,筛选高表达的食管鳞癌细胞进行后续实验;设计合成HOXA 1 ASODN链、正义寡核苷酸(SODN)链及无义寡核苷酸(N-ODN)链;将筛选出的高表达的食管鳞癌细胞分为HOXA1 ASODN组(5、10、15μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞)、对照组(细胞常规培养,不进行细胞转染)、SODN组(细胞转染15 μmol/L的SODN)和N-ODN组(细胞转染15 μmol/L的N-ODN).采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell小室分别检测细胞活力、凋亡率及侵袭迁移能力;Western blot检测HOXA1、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)、细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.结果 与正常食管上皮细胞Het-1A比较,人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05).HOXA1蛋白在Eca109细胞表达最高,因此选用Eca109细胞进行后续实验.转染HOXA1 ASODN的Eca109细胞HOXA1蛋白表达降低(P<0.05).随着Eca109细胞转染HOX
作者:王彦霞;张春强;韩菲
来源:四川大学学报(医学版) 2020 年 51卷 1期