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目的 建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric,HPLC-MS/MS)同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物(苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘)的方法.方法 取1 mL尿液,加入20μLβ-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37℃孵箱中酶解20 h.酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析.高效液相色谱分离采用反相C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,3.5μm),流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min.质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,内标标准曲线法定量.结果 8种代谢物在1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度(relative standard deviation,RSD)在0.05%~9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内.将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%~114.0%.结论 所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估.

作者:任建伟;罗新月;赵璇;王璇;朱婧;别明江;刘峻杉;丛雪;邹晓莉

来源:四川大学学报(医学版) 2020 年 51卷 5期

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作者:
任建伟;罗新月;赵璇;王璇;朱婧;别明江;刘峻杉;丛雪;邹晓莉
来源:
四川大学学报(医学版) 2020 年 51卷 5期
标签:
高效液相色谱串联质谱法 固相萃取 尿液 芳香化合物代谢物 生物监测
目的 建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric,HPLC-MS/MS)同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物(苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘)的方法.方法 取1 mL尿液,加入20μLβ-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37℃孵箱中酶解20 h.酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析.高效液相色谱分离采用反相C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,3.5μm),流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min.质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,内标标准曲线法定量.结果 8种代谢物在1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度(relative standard deviation,RSD)在0.05%~9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内.将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%~114.0%.结论 所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估.