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目的 探讨转染shArtemis干扰质粒对人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤的影响.方法 将人肝癌细胞分为正常对照组、脂质体对照组、空质粒对照组和转染shArtemis干扰质粒实验组(shArtemis实验组);建立DNA损伤模型,分别用0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用BEL-7402/5FU细胞24和48 h,MTT法检测细胞活性,Western blot观察磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达;转染Artemis干扰质粒,检测Artemis、γ-H2AX表达;彗星实验检测DNA的损伤.结果 0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用48h后肝癌细胞活力明显下降(P<0.05);丝裂霉素C刺激细胞48 h后,γ-H2AX的表达量随着药物浓度的增加而增加;转染shArtemis干扰质粒后,γ-H2AX的表达量较正常对照组增加(P<0.05);shArtemis实验组较正常对照组拖尾DNA量增加(P<0.05).结论 丝裂霉素C能够诱导肝癌细胞损伤;转染shArtemis干扰质粒促进丝裂霉素C诱导的人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤.

作者:张雪;李大玉;祝小波;范芳;刘云;李长福

来源:基础医学与临床 2016 年 36卷 3期

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张雪;李大玉;祝小波;范芳;刘云;李长福
来源:
基础医学与临床 2016 年 36卷 3期
标签:
Artemis 人肝癌细胞BEL-7402/5FU 丝裂霉素C DNA损伤 Artemis human hepatic carcinoma cell line BEL-7402/5FU mitomycin C DNA damage
目的 探讨转染shArtemis干扰质粒对人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤的影响.方法 将人肝癌细胞分为正常对照组、脂质体对照组、空质粒对照组和转染shArtemis干扰质粒实验组(shArtemis实验组);建立DNA损伤模型,分别用0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用BEL-7402/5FU细胞24和48 h,MTT法检测细胞活性,Western blot观察磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达;转染Artemis干扰质粒,检测Artemis、γ-H2AX表达;彗星实验检测DNA的损伤.结果 0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用48h后肝癌细胞活力明显下降(P<0.05);丝裂霉素C刺激细胞48 h后,γ-H2AX的表达量随着药物浓度的增加而增加;转染shArtemis干扰质粒后,γ-H2AX的表达量较正常对照组增加(P<0.05);shArtemis实验组较正常对照组拖尾DNA量增加(P<0.05).结论 丝裂霉素C能够诱导肝癌细胞损伤;转染shArtemis干扰质粒促进丝裂霉素C诱导的人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤.