目的 探讨构建BCR-ABL SH3-T79Y突变体(简称SH3-T79Y突变体)的重组腺病毒载体及其对白血病耐药细胞株K562/G01细胞凋亡的影响.方法 以pMig210质粒为模板,用重叠延伸PCR扩增SH3-T79Y突变体片段,将其克隆入重组腺病毒载体,通过鉴定、包装、扩增后得到含SH3-T79Y突变体的重组腺病毒.将重组腺病毒感染白血病K562/G01细胞株,测定其感染效率,瑞氏染色检查细胞形态学,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测BCR-ABL、CrkL磷酸化及总蛋白水平.结果 重组腺病毒载体构建成功.SH3-T79Y突变体转染K562/G01细胞株72 h效率大于80
作者:文良雪;刘鑫;李会;黄宁姝;黄峥兰;冯文莉
来源:基础医学与临床 2017 年 37卷 3期