目的:研究腺病毒携带CD20启动子调控的TRAIL基因特异性杀伤B-NHL细胞的作用.方法:人工合成含有CD20启动子片段-分泌信号-异亮氨酸拉链-sTRAIL(aa114 ～ aa281)-真核poly(A)序列的融合基因,装入腺病毒载体AdEasy系统,包装出携带P20-stTRAIL序列的腺病毒感染细胞,采用荧光素酶报告基因法研究CD20启动子在CD20+细胞系中的特异性转录,Western blotting验证TRAIL蛋白在细胞内的特异性表达,体外MTT法检测TRAIL特异性抑制CD20+细胞生长的作用.结果:成功构建携带P20-stTRAIL序列的腺病毒载体并分别感染CD20阳性和阴性淋巴瘤细胞系后发现,CD20启动子仅在CD20+的BJAB淋巴瘤细胞中具有转录活性、启动sTRAIL表达并在体外形成具有生物学功能的同源三聚体结构;在细胞中和培养上清中均检测到stTRAIL在mRNA和蛋白水平的表达,但在CD20细胞系中则无明显表达.体外功能实验显示,B JAB细胞在被AdP20-stTRAIL感染后自身生长受到明显抑制,而AdP20-stTRAIL感染的CD20阴性细胞以及空白载体感染的细胞未见生长抑制现象.结论:CD20启动子可以特异性调控腺病毒携带的治疗基因stTRAIL的表达,实现TRAIL对CD20+B-NHL细胞的靶向杀伤.
作者：张砚君；袁向飞；张晓龙；张晴；卢杨；杨圆圆；吴杰；熊冬生；范冬梅
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 3期
