目的 建立针对人腺病毒Hexon基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法,用于腺病毒感染的早期诊断及病毒核酸定量分析.方法 根据人腺病毒Hexon基因高度保守区设计引物和TaqMan探针,建立人腺病毒实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法.对方法的灵敏度及特异性进行评价;选取3个浓度的标准品,进行5次重复检测,对方法的重复性进行验证;用该方法对90份临床标本进行检测.结果 建立的检测方法对人腺病毒的检测与其它呼吸道病原无交叉反应;检测灵敏度为10拷贝/μl;对103、104、105拷贝/μl 3个浓度标准品分别进行5次重复检测,其Ct值的变异系数均小于5％.对临床90份发热病例的咽拭子标本检测的腺病毒阳性率为90％,与普通PCR检测法的结果(90％)一致;检测准确率达100％.结论 本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度和重复性均好,适用于人腺病毒的日常监测和暴发疫情的应急诊断.
作者：姚新华；郭英飞
来源：解放军预防医学杂志 2015 年 33卷 2期
