目的 针对Cpn0308基因建立检测肺炎衣原体的Taqman探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法.方法 根据肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308基因序列设计引物和Taqman探针,建立Taqman FQ-PCR检测体系,对反应体系进行优化,进行灵敏度、特异性、重复性评价;并与商品化肺炎衣原体核酸检测试剂盒检测临床标本进行对比分析.结果 肺炎衣原体TaqmanFQ-PCR方法的引物浓度300 nmol/L,探针浓度200 nmol/L,Mg2+ 4.0 mmol/L为最优反应条件;灵敏度为8.36×102copies/μL;该法对常见几种呼吸道病原菌及沙眼衣原体无交叉反应;重复性试验中4个浓度变异系数均小于3％.自建方法与商品化试剂盒对呼吸道感染组、心血管疾病组及正常对照组标本检出率分别为10％vs 10％ (x2 =0.167,P＞0.05),44.44％vs 40.74％(x2 =0,P＞0.05),6.67％ vs3.33％(x2 =0,P＞0.05),各组阳性率间差异无统计学意义;2种方法的总阳性率(16.54％ vs 14.96％)比较差异无统计学意义(x2=0.071,P＞0.05).结论 本研究建立的Taqman探针实时荧光定量PCR检测肺炎衣原体的方法灵敏度好,特异性高,重复性好,可应用于临床肺炎衣原体核酸检测.
作者：程永婷；贾晓晖；马良；贾天军
来源：临床检验杂志 2016 年 34卷 5期
