目的：建立一种快速、特异、敏感的小鼠多瘤病毒（ murine polyomavirus， MPyV）荧光定量 TaqMan PCR检测方法，用于MPyV核酸的检测。方法根据GenBank中小鼠多瘤病毒基因组序列设计了一对特异性引物及TaqMan探针，扩增长度为69 bp的片段，通过优化反应体系和反应条件，对构建的重组质粒标准品进行检测，并绘制标准曲线，进行特异性、敏感性和重复性试验。最后用建立的方法对人工感染MPyV的肺脏、脾脏和粪便，及86份小鼠临床样本进行检测，验证在临床应用中的效果。结果所建立的检测方法特异性强，只能在小鼠多瘤病毒DNA中检出荧光信号，检测灵敏度达到100拷贝，批内和批间重复性好，检测结果变异系数（ CV ）均小于1.13％，人工感染MPyV小鼠的肺脏、脾脏和粪便均为阳性，对86份临床样本进行检测，有3份样本呈阳性（阳性率为3.5％）。结论建立的MPyV荧光定量TaqMan-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好，适合用于MPyV临床诊断、日常监测和流行病学调查。
作者：尹雪琴；袁文；王静；黄碧洪；饶丹；伍妙梨；朱余军；冯胜鹏；郭鹏举；张钰；黄韧
来源：中国比较医学杂志 2015 年 6期
